丁酸梭菌不同添加形式對蝦生長、腸道結構、免疫指標及抗病力影響
導 讀
為了探究丁酸梭菌作為飼料添加劑的最佳有效形式，實驗設置6個組，飼料中分別添加丁酸梭菌活菌（LC組）、丁酸梭菌活菌和代謝物組（LCS組）、丁酸梭菌芽孢（DS組）、丁酸梭菌發酵上清液（FS）和破碎丁酸梭菌（CE組）；對照組為商品飼料。實驗結果表明，DS、LC、LCS和CE組的對蝦末體重和特定生長率顯著高於對照組和FS組（P <>這四組的飼料係數顯著低於對照組和FS組（P <>。與對照相比，DS、LC和LCS組的對蝦腸道絨毛數量和腸壁高度顯著增加（P <>
綜上，飼料中添加丁酸梭菌芽孢和活菌與發酵上清液混合物可以更好的調節對蝦的免疫反應。另外，單獨添加丁酸梭菌發酵上清液對對蝦沒有明顯的益生效果；而相對於添加單一活菌，添加活菌與發酵上清液的混合物可以更好地提高對蝦的免疫反應。因此，飼料中添加丁酸梭菌與其代謝物的混合物可以顯著提高對蝦的生長、腸絨毛高度、免疫力和對副溶血弧菌的抵抗力。
結 果
1、對蝦生長性能
如表2所示，各實驗組之間對蝦存活率沒有統計學差異（P > 0.05）。DS、LC、LCS和CE組對蝦的末體重和特定生長率顯著高於對照組和FS組，而它們的飼料係數顯著低於對照組和FS組。
（表2 對蝦生長性能）
2、攻毒實驗結果
各實驗組對蝦感染副溶血弧菌後，累計觀察14d，對蝦的累計死亡率見圖2。DS、LC、LCS和CE組對蝦的累計死亡率顯著低於對照組（P<0.05），而FS組對蝦累計死亡率與對照組之間沒有統計學差異（P>0.05）。
（圖 2 各實驗組攻毒實驗結果）
3、對蝦肝胰腺中LZM、proPO和SOD基因的表達
圖3所示，DS和LCS組對蝦肝胰腺中LZM、proPO和SOD基因相對錶達量顯著高於對照組。FS、DS、LC、LCS和CE組對蝦肝胰腺中LZM基因相對錶達量顯著高於對照組。
與FS、LC和CE組相比，DS和LCS組對蝦肝胰腺中LZM基因的相對錶達量顯著增加，但是它們之間沒有統計學差異（P>0.05）。
DS、LC、LCS組對蝦肝胰腺中proPO基因的相對錶達量顯著高於對照組。
（圖 3 不同添加形式的丁酸梭菌對對蝦肝胰腺中LZM、proPO和SOD基因表達量的影響）
4、對蝦肝胰腺中TollToll、Imd和Relish基因的表達
圖4所示，與對照組相比，DS和LCS組對蝦肝胰腺中Toll基因的相對錶達量顯著增加，而DS與LCS組之間沒有統計學差異（P>0.05）。
DS、LCS和CE組對蝦肝胰腺中Imd基因的相對錶達量顯著高於對照組。另外，FS組對蝦肝胰腺中Toll、Imd和Relish基因的相對錶達量與對照組之間沒有統計學差異（P>0.05）。
（圖 4 不同添加形式的丁酸梭菌對對蝦肝胰腺中Toll、Imd和Relish基因表達量的影響）
5、mTOR信號通路相關基因在對蝦肝胰腺的表達
圖5所示，與對照組相比，FS、DS、LC、LCS和CE組對蝦肝胰腺中TOR基因的相對錶達量顯著增加，而LCS組對蝦肝胰腺中TOR基因的相對錶達量顯著高於FS、DS、LC和CE組。
FS、DS、LC、LCS和CE組對蝦肝胰腺中4E-BP基因的相對錶達量顯著高於對照組，而DS、LC和LCS組之間沒有統計學差異（P>0.05）。
DS、LC、LCS和CE組對蝦肝胰腺中elF4Eα基因的相對錶達量顯著高於對照組，而它們之間沒有統計學差異（P<0.05）。
DS、LC、LCS和CE組對蝦肝胰腺中elF4E2基因的相對錶達量顯著高於對照組，而DS、LC和LCS組之間沒有統計學差異（P>0.05）。
（圖 5 不同形式的丁酸梭菌對對蝦肝胰腺中mTOR信號通路相關基因表達的影響）
結 論
1. 飼料中添加丁酸梭菌活菌、芽孢、破碎菌體和活菌與發酵上清混合物均可以顯著提高對蝦的生長性能和抗病力，而且可以顯著改善對蝦的腸道組織結構。
2. 飼料中單獨添加丁酸梭菌發酵上清液對對蝦沒有明顯的益生效果。
3. 飼料中添加芽孢和活菌與發酵上清液混合物可以調節對蝦的免疫反應。
4. 綜合對蝦的生長性能、抗病力、免疫反應和益生菌丁酸梭菌的儲存問題等，我們推薦丁酸梭菌芽孢更加適合作為料添加劑運用於對蝦的養殖。
原名：Effect of Clostridium butyricum in different forms on growth performance, disease resistance, expression of genes involved in immune responses and mTOR signaling pathway of Litopenaeus vannamai
期刊：Fish and Shellfish Immunology（IF：3.298）
作者＆通訊作者：李海東＆田相利
作者單位：中國海洋大學