菊花“满天星”的组织培养与快速繁殖
汤春梅
菊花（ Ｄｅｎｄｒａｎｔｈｅｍａ ｍｏｒｉｆｏｌｉｕｍ ）为菊科菊属的多年生宿根草本植物，是我国十大名花之一，也是世界四大切花之一，其品种繁多、花期各异、花色艳丽，是重要的园林及室内应用花卉。菊花传统的繁殖方式以扦插和分株为主，不仅需要较多母株材料，而且受季节和环境限制，其繁殖速度慢、幼苗质量差。利用组织培养技术，可在短时间内繁殖出大量生长一致的组培苗，还能解决因长期采用扦插和分株繁殖导致的种性退化、产量下降等问题。本文以菊花“满天星”的带芽茎段为外植体，研究不同激素对外植体不定芽诱导、增殖及生根的影响，旨在建立菊花“满天星”的组培快繁技术体系，为菊花“满天星”快速繁殖及规模化生产提供技术参考。
１ 材料与方法
１．１ 试验材料
供试材料为甘肃林业职业技术学院花卉品种示范基地引进的新优品种菊花“满天星”。
１．２ 试验方法
１．２．１ 外植体处理 取顶端幼嫩茎段，剪去叶片，用自来水冲洗 １ｈ ，在超净工作台上用 ７５％ 酒精浸泡３０ｓ ，无菌水冲洗３遍，再用０．１％升汞浸泡５ｍｉｎ，无菌水冲洗 ５ 遍，无菌滤纸吸干水分后备用。
１．２．２ 诱导培养 将处理好的材料剪成１．５ｃｍ 左右的带芽茎段，接种于 ＭＳ＋６ － ＢＡ （ １．０ 、 １．５ 、 ２．０ｍｇ ／Ｌ ） ＋ＮＡＡ （ ０．１ 、 ０．２ 、 ０．３ｍｇ ／ Ｌ ）的诱导培养基中，培养３０ｄ后统计诱导率。
１．２．３ 增殖培养 将上述培养基中诱导分化出的丛生芽分割成单芽后，接种于 ＭＳ＋６ － ＢＡ （ ０．５ 、 １．０ 、 １．５ｍｇ／ Ｌ ） ＋ＮＡＡ （０．１ 、 ０．２ 、 ０．３ ｍｇ ／ Ｌ ）的增殖培养基中，培养 ３０ｄ 后统计增殖系数。
１．２．４ 生根培养 将增殖培养产生的无根苗，切成２ｃｍ 左右的茎段，接种于 １ ／ ２ ＭＳ＋ＮＡＡ （ ０．１ 、 ０．２ 、０．３ｍｇ／ Ｌ ）的生根培养基中，１５ｄ 后统计生根率。
１．２．５ 培养条件 培养温度 ２３～２７℃ ，光照时间 １６ｈ ／ ｄ ，光照强度 ２０００～３０００ｌｘ ，以上培养基均附加蔗糖 ３％ 、琼脂 ０．６％ ，ｐＨ值为 ５．８ 。
２ 结果与分析
２．１ 不同激素浓度对外植体诱导的影响将带芽茎段接种于不同激素浓度的诱导培养基上，２ 周左右腋芽萌发出丛生芽，且基部切口处膨大出现愈伤组织，继续培养从愈伤组织上分化出绿色小芽。由表 １ 可知， ＮＡＡ 为 ０．２ｍｇ ／ Ｌ 和 ０．３ｍｇ ／ Ｌ 时，诱导的愈伤组织较多，但产生的丛生芽较少，说明ＮＡＡ 较高不利于丛生芽的诱导，并且容易产生畸形苗或玻璃化；当 ＮＡＡ为０．１ｍｇ／Ｌ时，６ － ＢＡ 在１．０～２．０ｍｇ／ Ｌ时，均能诱导出大量丛生芽，其中６ －ＢＡ 为１．５ｍｇ／ Ｌ时，诱导率可达１００％ ，且芽苗健壮、叶色浓绿。因此，菊花“满天星”最适诱导培养基为 ＭＳ＋６ －ＢＡ１．５ｍｇ／ Ｌ＋ＮＡＡ０．１ｍｇ ／ Ｌ 。
２．２ 不同激素浓度对增殖培养的影响将诱导分化的丛生芽分割成单芽接种于增殖培养基中，培养３０ｄ后增殖系数见表２ 。从表２可以看出，不同激素浓度对芽苗增殖与长势存在较大差异，当６－ ＢＡ为０．５ｍｇ／ Ｌ时，芽苗增殖系数较低，随着６－ＢＡ 浓度的升高，增殖系数逐渐升高，当６ － ＢＡ 为０．５ｍｇ／ Ｌ时，增殖系数达到５．２７，但６－ ＢＡ 为１．５ｍｇ
／Ｌ时，玻璃化程度较严重，说明 ６ － ＢＡ 对芽苗增殖有促进作用，但浓度过高不利于芽的正常生长。因此，菊花“满天星”增殖的最适培养基为 ＭＳ＋６ － ＢＡ１．０ｍｇ ／ Ｌ＋ＮＡＡ０．１ｍｇ／ Ｌ 。
表 １ 不同激素浓度对外植体诱导的影响
表 ２ 不同激素浓度对增殖培养的影响
２．３ 不同激素浓度对生根培养的影响
在生根培养基中培养 ５ｄ 左右，基部出现白色突起，随后逐渐伸长，２０ｄ 后能形成较为粗壮的根。由表 ３ 可知，培养基中添加不同浓度的 ＮＡＡ 均能诱导生根，且生根率均达 １００％ ，但在 １ ／ ２ ＭＳ＋ＮＡＡ０．１ｍｇ／ Ｌ 培养基上，不仅平均生根数多，而且根整齐粗壮、分枝丰富。因此，１ ／ ２ ＭＳ＋ＮＡＡ０．１ｍｇ ／ Ｌ 是菊花“满天星”的适宜生根培养基。
表 ３ 不同激素浓度对生根培养的影响
３ 结论与讨论
本研究以菊花“满天星”的茎段为外植体进行了组织培养与快速繁殖，试验结果表明，菊花“满天星”最适诱导培养基为 ＭＳ＋６ － ＢＡ１．５ｍｇ ／ Ｌ＋ＮＡＡ０．１ｍｇ／ Ｌ ，诱导率达１００％ ；最适增殖培养基为 ＭＳ＋６－ＢＡ１．０ｍｇ／ Ｌ＋ＮＡＡ０．１ｍｇ ／ Ｌ ，增殖系数达５．２７ ；菊花“满天星”生根较容易，在添加不同浓度 ＮＡＡ 的生根培养基中均能诱导生根，且生根率均达 １００％ ，但在１ ／ ２ＭＳ＋ＮＡＡ０．１ｍｇ ／ Ｌ培养基上长出的根较多，且根整齐粗壮，有利于后续的驯化移栽。
菊花“满天星”是一种花头很小、开花极多的新品种，其造型讨巧、可爱，深受人们喜爱，为优良的盆花、花坛、花境用花及切花材料，主要用于园林绿化和观赏，如制作花束、花环、秋季花坛、花台、盆花群等。目前菊花的繁殖一般采用分株和扦插等传统方法，以及组培快繁、工厂化生产等高新技术，可在短时间内获得大量菊花种苗。因此，建立完善的菊花“满天星”组培快繁技术体系，用于菊花“满天星”的规模化生产及园林推广应用具有很好前景。