公元553年，北周大将独孤信家中又添了一个女儿，她就是独孤信家最小的女儿独孤伽罗日后成为了隋文帝杨坚的皇后。独孤伽罗生于一个名门大家，祖籍云中，北周的时候寄籍洛阳。她的父亲独孤信是北周的大司马，由于功绩卓著被封为河内公，是当时北周的“八柱国”之一，掌管兵权，位高权重。独孤信有六个儿子和七个女儿，长女就是北周明帝宇文毓的皇后，第四个女儿嫁给了大将军李眄(唐高祖李渊之父)，独孤信一家在北周的权势炙手可热，而独孤信的第七女，就是独狐伽罗。北周武帝天和元年，十四岁的独孤伽罗嫁给了二十六岁的杨坚。
独孤伽罗嫁给杨坚之后，夫妻二人感情非常好，他们有五男五女，长女丽华，嫁给周宣帝，被立为“天元皇后”，深得宠爱。这样一来，独孤伽罗的姐姐是皇太后，女儿是皇后，杨坚一家的势力骤然增长，成为北周权势最大的家族。但是这时候的北周，皇权还有很大的势力，并不是取而代之的最好时机，独孤伽罗也与杨坚处处小心，隐忍养晦。此后杨坚因为功勋卓著被封为上柱国将军，掌握全国兵马，在朝中威望日重，逐渐引起了周宣帝的猜忌。杨丽华成了皇后，杨坚作为国丈，皇室对他的猜忌却没有因而有所减轻。宣帝甚至对皇后杨丽说:“你父亲如果惹火了我，我也会诛杀你全家。”
大象二年，周宣帝和杨丽华之间发生争执。周宣帝很生气，但是杨丽华却神色自如，一点也没有认错的意思。周宣帝大怒，下令将杨丽华赐死。杨氏一家担心杨丽华被赐死不单会失去已有的富贵，甚至还会有满门抄斩的命运。杨家上下一片混乱，独孤氏亲自人宫叩头求饶，周宣帝才收回成命，不杀杨丽华。杨家采取了隐忍不发的策略，保住了女儿的性命，也使得杨氏一门的权势和地位得到了保全。同年，正值青春年华的周宣帝因病死去，新继位的静帝宇文阐只有八岁。不能料理朝政。杨坚就在众人的拥戴下以大丞相的身份辅政，总揽朝廷内外的军国大事，国家大事都由他来决断。这时候的杨坚在朝中户的势力已经无人能及了。这时国家的政治不稳，杨氏代周的潘言四起。而独孤伽罗认为这时反对的势力还很大，称帝的时机还没有成熟，竭力地劝说杨坚暂时不要代周自立。
正当杨坚犹豫不决的时候，果然不出独孤伽罗所料，相州的总管尉迟迥举兵反叛，其余还有些人回应。杨坚调兵遣将，率兵讨伐，很快就消灭了这些势力。在灭了这些军队之后，杨坚听说尉迟迥的起兵与宇文氏诸王的怂恿有关，于是就在剿灭叛军后软禁了那些字文氏的王侯。这样一来，杨坚就独霸了朝政，再也无人敢过问了。这次叛乱证实了独孤氏的见解，杨坚对她的建议更加重视。
静帝迫于形势封杨坚为隋王，允许杨坚带剑上殿，上朝的时候也可以不下跪。后来，在杨坚的要求下，静帝又赐给他只有皇帝才能戴的十二旒王冕和天子才能使用的旌旗，这些都已经超过了臣子所能享受的最高礼节限度。这时候，独孤伽罗密切关注天下舆论，她看到多数人对杨坚并不反感，就认定这是个有利的时机，于是就派人给在外带兵的杨坚送去消息，说:“天下人都觉得你会代周自立，既然已经骑虎难下了，不如干脆就这样做算了，大丈夫处世就是要建功立业，夫君一定要抓住这个机会啊！”正是独孤伽罗的支持，使得杨坚最终下定了代周自立的决心。北周大定元年，杨坚终于废掉了年幼的周静帝，自称皇帝，改年号为开皇，建立了隋王朝。
独孤皇后平日生活俭朴，不好华丽，专喜读书，知古通今。隋文帝治政稍有不要之处，她就忠心苦劝。当时突厥与隋朝通商贸易，有一盒明珠，价值八百万，幽州总管殷寿让她买下，她婉言谢绝，并说:“如今外敌屡次侵犯，将士征战疲劳，不如把这八百万奖赏给有功的将士。”此举立刻朝野传闻，受到百官称赞。
独孤皇后还暗中派遣官官监察朝政，若有她认为不妥的地方，等隋文帝退朝后，她就婉言进谏，隋文帝也常常采纳她的意见。她曾劝隋文帝从酉城商人手中买下价值十万两黄金的宝玉，理由是“有了这笔巨资，将来可以养活一万名士兵”，仅从这一点，就能确信独孤后是位才智过人的女性。宫中上下一直都十分的敬重她，把她与隋文帝合称为“二圣”。