在很多关于健康问题的诊断过程中,尤其是血清学检测中,免疫分析法是特别强大、灵敏的检测方法。那么下面我们来一起了解一下免疫分析法吧!
一、什么是免疫分析法?
免疫分析法是利用毒物与标记毒物竞争性结合抗体检测毒物的方法。可用于某些毒药物的筛选试验。
利用免疫分析法进行检测,当没有加入非标记毒药物时,抗体完全与标记毒药物结合生成标记毒药物-抗体复合物。加入非标记毒药物后,非标记毒药物也将与抗体结合,生成非标记毒药物抗体复合物,从而抑制标记毒药物与抗体的结合反应,使生成产物中标记毒药物的含量降低。
若抗体和标记毒药物的量固定,则加入的非标记毒药物的量与复合物中 标记毒药物的含量之间存在一定的函数关 系。选择合适的方法检测复合物中的标记毒药物,则可据此计算出检材中毒药物的量。
二、免疫分析法的类别
非标记免疫分析技术:免疫扩散、免疫电泳
标记的免疫分析技术:酶免疫分析、放射免疫分析、磁敏免疫分析、其它免疫分析法(荧光免疫技术、胶体金免疫技术、发光免疫技术和铁蛋白免疫技术等)
三、免疫分析法的应用
在药物分析中,免疫分析法的应用主要集中在以下几方面:
在实验药物动力学和临床药物学中测定生物利用度和药物代谢动力学参数等生物药剂学中的重要数据,以便了解药物在体内的吸收、分解、代谢和排泄情况;
在药物的临床检测中,对治疗指数小、超过安全剂量易发生严重不良反应或最佳治疗浓度和毒性反应浓度有交叉的药物血液浓度进行监测;
在药物生产中从发酵液或细胞培养液中快速测定有效组分的含量,以实现对生产过程的在线监测;
对药品中是否存在特定的微量有害杂质进行评价。
四、免疫分析在多种疾病诊断起重要作用
各类免疫测定技术各有优缺点,例如,快速测定法(如胶体金侧向流动法)可在数min 内提供定性结果,可进行即时检测,而ELISA可能需要花费数小时才能完成,但可提供定量数据。
而当前严重急性呼吸系统综合症冠状病毒2(SARS-CoV-2)大流行更加凸显了侧向流动分析的优势,由于该疾病具有快速传播和较高的死亡率等特征,美国FDA已采取相关措施,允许各州未经FDA批准就可开展新的SARS-CoV-2检测。
该修订允许使用快速检测试剂盒,该试剂盒定性检测患者针对SARS-CoV-2产生的IgG和IgM抗体,从而显著加大了SARS-CoV-2的检测能力,尽可能地减少病毒的传播。尽管侧向流动检测具有明显的优势,但这种分析方法无法提供定量的数据。
尽管免疫测定的功能和目的有所不同,但为了在临床上获得准确,可靠数据,开发血清学试剂盒时,高质量试剂至关重要。抗人二抗的质量是开发免疫测定试剂盒时的关键考虑因素,二抗需要谨慎选择,因为它们会结合一种一抗的多个表位上,从而增强了信号的灵敏度和选择性。
文章来源:每日生物评论
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