林肯的最後一天指1865年4月14日，這一天在日曆上是耶穌的殉難日。
這天林肯預定的日程表是：8點以前辦公，然後進早餐，在11點內閣會議前接見來訪者；午餐，再接見客人；傍晚偕同夫人乘馬車兜風，同伊利諾斯州的舊友非正式會晤；一天之間去陸軍部一兩次；又一次會客，然後和夫人及幾名隨從去劇院。
這天上午格蘭特首次和總統及內閣一起開會。會議的主題是關於南部重建方面的一些問題，並預期在4月18日再次開會，繼續討論如何醫治戰爭創傷的問題。
午餐時間，在白宮大門口發生了一個小插曲：一個黑人婦女要求拜見總統先生，在入口處被衞兵給攔住了。然後不知是婦女喊叫的緣故，還是她要進白宮造成的小小的騷動傳到了總統辦公室。門突然開了，林肯總統從裏面走出來，親切地把這位意外的來訪者引進白宮。
他耐心地聽完這位婦女講述她和她丈夫託姆的生活情況，並答應要解決她遇到的拖欠軍餉的問題。總統的親切和真誠讓這位黑人婦女感覺到自己“生來就像是一個貴婦人”。
傍晚時分，林肯來到了陸軍部。突然，他令人驚訝地轉過身對跟隨他的克魯克説：“克魯克，我相信有人想要殺害我，你知道嗎？”在這以前，當別人提醒他要提防被害時，林肯總是一笑置之。
晚餐時，總統顯得興致勃勃，不同尋常，對國家的現狀充滿了希望和信心。雖然他對晚上的戲並沒有熱情，本來是不想去看的，但還是很高興地同夫人一起坐馬車來到福特劇院。一同前往的還有亨利裏德·拉思伯恩和他的未婚妻以及衞士約翰·帕克。
晚上9點左右，總統走進了劇院，在座的上千名觀眾一起鼓掌歡迎，發出歡呼聲，林肯也停步向人們致意。然後來到他的包廂，坐在扶手椅上。包廂的兩道門都掛上了大鎖，一切看起來再安全不過了。然而，總統身後的這道門上的一個小孔，明顯有剛鑽過的痕跡，而且居然沒人發現。在衞士約翰·帕克偷懶離崗時，有一雙眼睛通過這個小孔往裏面觀察着坐在扶手搖椅上的林肯，伺機刺殺。
這個刺客叫約翰·威爾克斯·布思，是一個演員。他見門口無人，輕輕地拉開了門，右手拿着一支銅製的單發大口徑小手槍，這是一種致命的八盎司重的袖珍手槍，左手握着一把匕首。他舉起手槍，瞄準了五英尺之內的總統的頭顱。隨着一聲巨響，子彈從林肯的左側射進他的後腦，並停留在右眼眶後幾英寸的地方。隨後兇手又舉起匕首刺向了拉思伯恩少校。然後是尖叫聲和一片混亂。
林肯沒有在被擊中時即刻死亡，他的夫人緊緊地抓着他的手，再三告訴他：“活下去！你必須活下去！”但林肯受的是致命傷。他的最後一次呼吸是在1865年4月15日上午7點21分55秒，最後一次心臟跳動是在7點22分10秒。林肯，這個與全世界人民爭取自由的鬥爭緊密聯繫在一起的傳奇人物，永遠地離開了這個世界。