菊花“滿天星”的組織培養與快速繁殖
湯春梅
菊花（ Ｄｅｎｄｒａｎｔｈｅｍａ ｍｏｒｉｆｏｌｉｕｍ ）為菊科菊屬的多年生宿根草本植物，是我國十大名花之一，也是世界四大切花之一，其品種繁多、花期各異、花色豔麗，是重要的園林及室內應用花卉。菊花傳統的繁殖方式以扦插和分株為主，不僅需要較多母株材料，而且受季節和環境限制，其繁殖速度慢、幼苗質量差。利用組織培養技術，可在短時間內繁殖出大量生長一致的組培苗，還能解決因長期採用扦插和分株繁殖導致的種性退化、產量下降等問題。本文以菊花“滿天星”的帶芽莖段為外植體，研究不同激素對外植體不定芽誘導、增殖及生根的影響，旨在建立菊花“滿天星”的組培快繁技術體系，為菊花“滿天星”快速繁殖及規模化生產提供技術參考。
１ 材料與方法
１．１ 試驗材料
供試材料為甘肅林業職業技術學院花卉品種示範基地引進的新優品種菊花“滿天星”。
１．２ 試驗方法
１．２．１ 外植體處理 取頂端幼嫩莖段，剪去葉片，用自來水沖洗 １ｈ ，在超淨工作臺上用 ７５％ 酒精浸泡３０ｓ ，無菌水沖洗３遍，再用０．１％昇汞浸泡５ｍｉｎ，無菌水沖洗 ５ 遍，無菌濾紙吸乾水分後備用。
１．２．２ 誘導培養 將處理好的材料剪成１．５ｃｍ 左右的帶芽莖段，接種於 ＭＳ＋６ － ＢＡ （ １．０ 、 １．５ 、 ２．０ｍｇ ／Ｌ ） ＋ＮＡＡ （ ０．１ 、 ０．２ 、 ０．３ｍｇ ／ Ｌ ）的誘導培養基中，培養３０ｄ後統計誘導率。
１．２．３ 增殖培養 將上述培養基中誘導分化出的叢生芽分割成單芽後，接種於 ＭＳ＋６ － ＢＡ （ ０．５ 、 １．０ 、 １．５ｍｇ／ Ｌ ） ＋ＮＡＡ （０．１ 、 ０．２ 、 ０．３ ｍｇ ／ Ｌ ）的增殖培養基中，培養 ３０ｄ 後統計增殖係數。
１．２．４ 生根培養 將增殖培養產生的無根苗，切成２ｃｍ 左右的莖段，接種於 １ ／ ２ ＭＳ＋ＮＡＡ （ ０．１ 、 ０．２ 、０．３ｍｇ／ Ｌ ）的生根培養基中，１５ｄ 後統計生根率。
１．２．５ 培養條件 培養溫度 ２３～２７℃ ，光照時間 １６ｈ ／ ｄ ，光照強度 ２０００～３０００ｌｘ ，以上培養基均附加蔗糖 ３％ 、瓊脂 ０．６％ ，ｐＨ值為 ５．８ 。
２ 結果與分析
２．１ 不同激素濃度對外植體誘導的影響將帶芽莖段接種於不同激素濃度的誘導培養基上，２ 周左右腋芽萌發出叢生芽，且基部切口處膨大出現愈傷組織，繼續培養從愈傷組織上分化出綠色小芽。由表 １ 可知， ＮＡＡ 為 ０．２ｍｇ ／ Ｌ 和 ０．３ｍｇ ／ Ｌ 時，誘導的愈傷組織較多，但產生的叢生芽較少，說明ＮＡＡ 較高不利於叢生芽的誘導，並且容易產生畸形苗或玻璃化；當 ＮＡＡ為０．１ｍｇ／Ｌ時，６ － ＢＡ 在１．０～２．０ｍｇ／ Ｌ時，均能誘匯出大量叢生芽，其中６ －ＢＡ 為１．５ｍｇ／ Ｌ時，誘導率可達１００％ ，且芽苗健壯、葉色濃綠。因此，菊花“滿天星”最適誘導培養基為 ＭＳ＋６ －ＢＡ１．５ｍｇ／ Ｌ＋ＮＡＡ０．１ｍｇ ／ Ｌ 。
２．２ 不同激素濃度對增殖培養的影響將誘導分化的叢生芽分割成單芽接種於增殖培養基中，培養３０ｄ後增殖係數見表２ 。從表２可以看出，不同激素濃度對芽苗增殖與長勢存在較大差異，當６－ ＢＡ為０．５ｍｇ／ Ｌ時，芽苗增殖係數較低，隨著６－ＢＡ 濃度的升高，增殖係數逐漸升高，當６ － ＢＡ 為０．５ｍｇ／ Ｌ時，增殖係數達到５．２７，但６－ ＢＡ 為１．５ｍｇ
／Ｌ時，玻璃化程度較嚴重，說明 ６ － ＢＡ 對芽苗增殖有促進作用，但濃度過高不利於芽的正常生長。因此，菊花“滿天星”增殖的最適培養基為 ＭＳ＋６ － ＢＡ１．０ｍｇ ／ Ｌ＋ＮＡＡ０．１ｍｇ／ Ｌ 。
表 １ 不同激素濃度對外植體誘導的影響
表 ２ 不同激素濃度對增殖培養的影響
２．３ 不同激素濃度對生根培養的影響
在生根培養基中培養 ５ｄ 左右，基部出現白色突起，隨後逐漸伸長，２０ｄ 後能形成較為粗壯的根。由表 ３ 可知，培養基中新增不同濃度的 ＮＡＡ 均能誘導生根，且生根率均達 １００％ ，但在 １ ／ ２ ＭＳ＋ＮＡＡ０．１ｍｇ／ Ｌ 培養基上，不僅平均生根數多，而且根整齊粗壯、分枝豐富。因此，１ ／ ２ ＭＳ＋ＮＡＡ０．１ｍｇ ／ Ｌ 是菊花“滿天星”的適宜生根培養基。
表 ３ 不同激素濃度對生根培養的影響
３ 結論與討論
本研究以菊花“滿天星”的莖段為外植體進行了組織培養與快速繁殖，試驗結果表明，菊花“滿天星”最適誘導培養基為 ＭＳ＋６ － ＢＡ１．５ｍｇ ／ Ｌ＋ＮＡＡ０．１ｍｇ／ Ｌ ，誘導率達１００％ ；最適增殖培養基為 ＭＳ＋６－ＢＡ１．０ｍｇ／ Ｌ＋ＮＡＡ０．１ｍｇ ／ Ｌ ，增殖係數達５．２７ ；菊花“滿天星”生根較容易，在新增不同濃度 ＮＡＡ 的生根培養基中均能誘導生根，且生根率均達 １００％ ，但在１ ／ ２ＭＳ＋ＮＡＡ０．１ｍｇ ／ Ｌ培養基上長出的根較多，且根整齊粗壯，有利於後續的馴化移栽。
菊花“滿天星”是一種花頭很小、開花極多的新品種，其造型討巧、可愛，深受人們喜愛，為優良的盆花、花壇、花境用花及切花材料，主要用於園林綠化和觀賞，如製作花束、花環、秋季花壇、花臺、盆花群等。目前菊花的繁殖一般採用分株和扦插等傳統方法，以及組培快繁、工廠化生產等高新技術，可在短時間內獲得大量菊花種苗。因此，建立完善的菊花“滿天星”組培快繁技術體系，用於菊花“滿天星”的規模化生產及園林推廣應用具有很好前景。